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    1. 高效液相色譜中溶劑效應(yīng)理論

      2024-01-23 14:16:15 HJX

      在高效液相色譜(HPLC)中,溶劑效應(yīng)是指由于溶劑的種類和濃度對溶質(zhì)在流動相和固定相之間的分配系數(shù)的影響,進(jìn)而影響溶質(zhì)的保留行為和色譜峰的形狀的現(xiàn)象。


      溶劑效應(yīng)的產(chǎn)生主要有兩個原因:


      1. 溶劑強(qiáng)度:在反相色譜系統(tǒng)中,溶劑強(qiáng)度對溶質(zhì)的保留行為有顯著影響。通常,溶劑強(qiáng)度與溶劑的極性呈正相關(guān),極性越強(qiáng),溶劑強(qiáng)度越大。在反相色譜中,流動相的極性會隨著有機(jī)溶劑比例的增加而降低,這會影響溶質(zhì)在固定相和流動相之間的分配系數(shù),進(jìn)而影響溶質(zhì)的保留時間和峰形。

      2. 進(jìn)樣體積:進(jìn)樣體積對溶劑效應(yīng)的影響主要表現(xiàn)在增加進(jìn)樣體積可能導(dǎo)致目標(biāo)分析物色譜峰變形。這是因?yàn)楫?dāng)溶劑強(qiáng)度大于該樣品出峰時流動相強(qiáng)度時,一部分樣品溶解于流動相中的溶劑會被迅速洗脫出色譜柱,而另一部分樣品溶解于流動相中被流動相洗脫,這可能導(dǎo)致色譜峰的展寬或分叉。


      在實(shí)際應(yīng)用中,為了減小溶劑效應(yīng)的影響,可以采用以下措施:


      1. 選擇合適的流動相:根據(jù)待測物質(zhì)的性質(zhì)選擇合適的流動相,盡量減小流動相與固定相之間的差異。

      2. 優(yōu)化進(jìn)樣體積:在保證樣品完全溶解的前提下,盡量減小進(jìn)樣體積,以減小溶劑效應(yīng)的影響。

      3. 梯度洗脫:通過改變流動相的組成或濃度,實(shí)現(xiàn)梯度洗脫,以減小溶劑效應(yīng)的影響。

      4. 更換固定相:嘗試使用不同性質(zhì)的固定相,以減小溶劑效應(yīng)的影響。

      5. 采用特殊檢測器:如蒸發(fā)光散射檢測器等,可以降低溶劑效應(yīng)的影響。


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